食品中蛋白质凯氏定氮法测定比较

导读: 摘要:蛋白质含量测定是食品检验工作中的一项重要内容，蛋白质含量的测定方法有好多种，按照国家标准(GB5009.5-2016)有第一法凯氏定氮法、第二法分光光度法、第三法燃烧法。测定

来源：未知发布日期：2022-01-13 22:41【大中小】

    蛋白质测定涉及企业生产和监督检测众多领域。本次测验用凯氏定氮法检测，在操作过程中总结出两仪器方法的适用条件及操作事项，以便在检测工作中更好的掌握蛋白质的检测。
1检测试剂
    所需试剂均为分析纯，检测用水为实验室合格水。混合催化剂(硫酸铜和硫酸钾)，硼酸溶液(20 g/L)，澳甲酚绿指示剂(10 g/L)，甲基红指示(lOg/L)，亚甲基蓝指示剂(10 g/L) ,氢氧化钠(400 g/L) ,硫酸，甲基红澳甲酚绿混合指示液。(0.050 mol/L)硫酸标准滴定溶液。
2检测用设备
    电子天平:精度为O.l mg。玻璃定氮装置;上海纤检仪器有限公司自动凯氏定氮仪。
3样品前处理
    称取样品(以奶粉为例)0.5 g左右，放入100 mL定氮瓶中，加入混合催化剂及20 m L硫酸液，在瓶口放小号玻璃漏斗，转入通风橱内，在电炉或石墨炉上加热消解，待样品碳化，升高温度，使瓶内液体微沸，直至液体呈淡绿色透明，再消解1h。消解好后冷却，用水冲洗瓶壁，冷却定容至100 m L容量瓶中，摇匀待用。同时做空白。
4用玻璃定氮仪检测
    连接好定氮蒸馏仪器，在500 m L蒸馏瓶内加水至2/3处，放几粒玻璃珠，加甲基红指示剂3滴和硫酸1 mL，使蒸馏水显酸性，加热蒸馏瓶内的水保持沸腾。
    打开装置冷凝水，接收瓶加入10.0 m L硼酸溶液及3滴混合滴定指示液。接收瓶放在冷凝管的下端插入液面里。精确吸取10.0 m L前处理消解液，注入定氮装置瓶，用少许水冲洗瓶壁，沿瓶壁向定氮装置内加入40%氢氧化钠溶液20 m L，立即密封装置。打开蒸馏大约10 min左右，移动接收瓶使冷凝管下端离开液面，继续蒸馏2 minx蒸馏好后用少许水冲洗冷凝管下部，取下接收瓶，以硫酸标准滴定溶液滴定至混合指示液为浅灰红色。同时做空白对照。
5用自动凯氏定氮仪检测
5.1仪器空白测试
    首先使用的各个试剂准备充足，换酸清洗完成后(3次左右)，做空白测试。连续做空白测试，结果一致后，仪器稳定即可连续测试，空白结果最大值减去最小值小于0.05 m L时，仪器可以使用。
5.2样品检测
    仪器空白稳定后，做样品空白测试，设置好试剂加入量和蒸馏时间，进行测试。连续做2^'3次空白测试。每次测试滴定后，接收杯必须清洗2^'3次，然后可进行下一次测试。空白样品测试完成后，取几次平均值输入空白值一栏，同时输入所测样品的取样质量0.500 0 g，精确吸取10.0 m L定容后的样液，加入蒸馏管中，进行测试样品。连续测试2^'4次，测试完成后仪器显示结果可以打印保存。然后取平行数据出检验结果。
6结果比较
    以奶粉为例，两种方法的检测结果见下表。

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食品中蛋白质凯氏定氮法测定比较

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